重组人神经生长因子昆虫表达载体的构建及表达

被引：2

作者：

李佳楠

韩诗

周世力

机构：

[1] 江汉大学生命科学学院生物技术系

来源：

江汉大学学报(自然科学版) | 2010年 / 38卷 / 01期

关键词：

rh-NGF; 杆状病毒载体; 昆虫细胞表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的:构建重组人神经生长因子(rh-NGF)杆状病毒表达载体,转染昆虫细胞从而获得目的蛋白的大量表达.方法:从人胎盘组织中提取细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增-NGF基因片段,经BamHI、HindⅢ双酶切后插入杆状病毒表达载体pFastBacTMDual的多克隆位点处,构建出重组载体pFastBacTM-Dual+[rh-NGF].对构建的载体进行PCR和酶切鉴定并测序.采用脂质体转染方法将表达载体转入昆虫细胞系Sf9中,通过双抗夹心ELISA对rh-NGF的表达进行检测.结果:构建的rh-NGF基因插入正确且序列与GenBank一致.ELISA检测结果显示病毒感染的Sf9细胞可表达rh-NGF.结论:成功构建出杆状病毒表达载体pFastBacTMDual+[rh-NGF],并在昆虫细胞系Sf9中得到表达,为大量制备重组人神经生长因子奠定了基础.

引用

页码：67 / 69+73 +73

页数：4

共 10 条

[1] 重组人神经生长因子β腺病毒的构建及鉴定 [J].

冯波 ;

李青旺 ;

肖波 ;

韩增胜 ;

支旭勃 .

安徽农业科学, 2008, (02) :457-459+511

[2]

Expression and Purification of Active Recombinant Human Nerve Growth Factor from Escherichia coli[J]. HE Ling-bing1,2, WANG Yan2,3, WANG Ge4, CHEN Chao4 and CAO Shu-gui3 1. College of Life Science ＆ Biotechnology, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240, P. R. China;2. Shenzhen Neptunus Interlong Bio-tech Holdings Co., Ltd., Shenzhen 518054, P. R. China;3. Key Laboratory for Molecular Enzymology ＆ Engineering of Ministry of Education, Jilin University, Changchun 130012, P. R. China;4. Shan

[3] 酵母分泌表达重组人神经生长因子 [J].