大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后自噬的初步研究

目的:研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后自噬溶酶体相关蛋白随损伤时间表达的规律,检测自噬体、溶酶体的变化。方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,免疫组织化学法检测损伤周边区(皮质)自噬溶酶体相关蛋白Beclin 1、cathepsin B的表达,透射电镜观察脑缺血再灌注损伤后神经细胞内自噬体的形成和溶酶体的激活。结果:免疫组织化学检测显示,脑缺血再灌注损伤后4 h Beclin 1阳性细胞增加(P<0.01),24 h达高峰,5 d仍有较多阳性细胞(P<0.01)。脑缺血再灌注损伤后2h cathepsin B阳性细胞增加(P<0.01),12h达高峰,5 d仍有较多阳性细胞(P<0.01)。透射电镜显示,脑缺血再灌注损伤后2 h即可见到损伤周边区神经细胞内自噬体形成、溶酶体增多,12～24 h最为明显,持续到5 d。脑缺血再灌注损伤后表现为自噬溶酶体相关蛋白Beclin 1、cathepsin B阳性细胞数随损伤时间而变化,以及缺血半暗带内自噬体的形成和溶酶体的激活。结果:大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤能激活自噬溶酶体途径。