栀子苷、京尼平、栀子蓝的体内外肝毒性对比研究

目的:通过动物与细胞实验,比较栀子苷与京尼平、栀子蓝体内外肝毒性,进一步明确中药栀子致肝毒性的物质基础,为栀子临床安全应用提供科学依据。方法:（1）体内实验部分:采用动物实验方法测定大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,碱性磷酸酶（ALP）,总胆红素（TBIL）;（2）体外实验部分:采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测不同浓度栀子苷、京尼平及栀子蓝的细胞毒作用;试剂盒法测定细胞上清液中ALT,AST的活力。结果:（1）与空白组比较,栀子苷灌胃给药0.4、1.2 g·kg-1 24 h后都表现为ALT、AST、TBIL值明显升高（P<0.05,P<0.01）,腹腔注射0.4、1.2 g·kg-1 24 h后生化指标未表现出异常。京尼平腹腔注射0.1 g·kg-1 24 h后AST、TBIL明显升高（P<0.05,P<0.01）,0.2、0.4 g·kg-1组全部死亡,京尼平灌胃0.2、0.4 g·kg-1组ALT、AST、TBIL肝功能指标不同程度升高（P<0.05,P<0.01）。栀子蓝腹腔注射1.5 g·kg-1 TBIL明显升高（P<0.05）,栀子蓝灌胃6 g·kg-1 ALP、ALT、AST、TBIL均无明显变化。（2）细胞毒性实验结果显示,与阴性对照组相比,栀子苷给药组800、1000μg·mL-1抑制人体肝细胞L-O2细胞的增殖（P<0.01,P<0.05）,同时ALT测定结果显示,800、1000μg·mL-1可以显著提高肝细胞培养上清液中ALT的活力（P<0.01,P<0.05）。栀子蓝给药组200、600、800、1000μg·mL-1可抑制人体肝细胞L-O2细胞的增殖（P<0.01）,ALT测定结果显示800、1000μg·mL-1可显著增加ALT活力（P<0.01）。京尼平给药组50、100、150、200、250、3000μg·mL-1具有显著的细胞毒作用（P<0.01）,ALT测定结果显示100、150μg·mL-1明显提高肝细胞培养上清液中ALT活力（P<0.05）。结论:京尼平具有明确的体内外肝毒性,推测京尼平可能是栀子苷在体内的毒性物质基础。