牛膝提取物对碘乙酸钠诱导的软骨细胞保护作用

目的:探讨牛膝提取物对碘乙酸钠(MIA)诱导的软骨细胞保护作用。方法:通过Ⅱ型胶原酶消化SD大鼠软骨,获得软骨细胞,实验分为5组,分别为正常组,模型组(4μmol·L-1MIA),牛膝提取物低剂量组(10 mg·L-1+4μmol·L-1MIA),牛膝提取物中剂量组(30 mg·L-1+4μmol·L-1MIA),牛膝提取物高剂量组(100 mg·L-1+4μmol·L-1MIA),造模与给药分别为24 h;MTT法检测各组软骨细胞活力;Hoechst 33258染色法检测各组软骨细胞形态变化;分光光度法检测各组软骨细胞中Caspase-3活性;Western blot分析各组AKT激活状况及下游靶分子Bax,Bcl-2的表达。结果:与正常组比较,模型组中软骨细胞活力下降,细胞核发生皱缩或裂解,细胞中Caspase-3活性和Bax表达量上升,Bcl-2表达量下降,AKT磷酸化程度降低,差异均具有显著性意义(P<0.01)。与模型组比较,牛膝提取物中、高剂量组可改善软骨细胞活力,恢复软骨细胞形态并抑制Bax表达;牛膝提取物低、中、高剂量组皆能降低大鼠软骨细胞中Caspase-3活性,提高Bcl-2表达,并促进AKT磷酸化,差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:牛膝提取物具有保护MIA诱导的软骨细胞作用,是通过抑制软骨细胞凋亡实现的,可能与PI3K/AKT信号通路有关。