不同显色剂对牛膝总皂苷含量测定的影响

目的:考察不同显色方法对紫外-可见分光光度法测定牛膝总皂苷含量的影响。方法:采用紫外-可见分光光度法测定牛膝总皂苷含量,分别用5种方法进行显色,显色剂方法 A为5%香草醛-冰乙酸:高氯酸:冰乙酸(2∶8∶50),方法 B为5%香草醛-冰乙酸:高氯酸:乙酸乙酯(2∶8∶50),方法 C为高氯酸,方法 D为浓硫酸-甲醇(7∶3),方法 E为香草醛-浓硫酸(2∶58)。以吸光度为指标,通过单因素试验考察显色时间和显色温度。结果:方法 C和D在400800 nm处无最大吸收;方法E最大吸收波长544 nm,但吸光度数值太小,不适合标准曲线测定;方法 A和B均适合牛膝总皂苷含量的测定,最大吸收波长分别为(548±1),(554±1)nm,方法 A峰型、加样回收率均优于方法 B。显色时间15 min,显色温度60℃。结论:方法 A为牛膝总皂苷的最佳显色方法。