大籽蒿花粉过敏原的分离、鉴定与纯化

目的:对我国蒿属花粉中常见的大籽蒿花粉进行分离、鉴定与纯化。方法:提取大籽蒿花粉粗浸液,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离蛋白质组分,并用凝胶成像系统测定各组分的相对分子质量(Mr);免疫印迹(Western blot)鉴定花粉主要过敏原;通过DEAE-Cellulose DE-52离子交换层析(Ion exchange chromatography,IEC)对大籽蒿花粉过敏原进行纯化和免疫印迹鉴定。结果:分离后得到20多种蛋白组分,其中分子量(Mr)为62、57、38、29、25、14 kD 6个条带蛋白含量最丰富,其中Mr为62 kD和16 kD的蛋白条带与确诊的蒿属花粉过敏患者血清特异性IgE结合率最高(均>50%),为其主要过敏原,离子交换层析纯化后可得到Mr为62、16 kD的过敏原。结论:大籽蒿花粉的主要过敏原为Mr 62 kD和16 kD的蛋白组分,离子交换层析技术可以对Mr为62 kD、16 kD的主要过敏原成分进行纯化。