评价小鼠脑片缺血性损伤及药物保护作用定量方法的改进

目的 :通过改进和完善脑片孵育装置、脑片缺血性损伤的定量指标 ,建立一种简单、准确评价小鼠脑片缺血性损伤及药物神经保护作用的新方法。方法 :设计和制作脑片孵育装置 ,并验证其适用性。以 TTC为底物在小鼠脑片生物合成 formazan标准品 ,并作分离、纯化和鉴定。以缺氧缺糖 (OGD)方法诱导小鼠脑片损伤 ,用分光光度法在 4 90 nm处测量皮质和纹状体 formazan量 ,并观察依达拉奉和 ONO- 10 78的保护作用。结果 :脑片孵育装置具有良好的平行性和可操作性。获得了纯度为 99.3%的 formazan对照品 ,在 0 .0 5～ 1mg/ml间与 4 90 nm的吸收度有良好的线性关系 (r=0 .9997)。随 OGD时间延长 ,脑片皮质和纹状体 formazan量逐渐减少 ;依达拉奉对此有显著保护作用 ,而 ONO- 10 78无效。结论 :脑片孵育新装置及 formazan定量方法效率高、定量准确、简单易行 ,可用于缺血性脑损伤保护药物的筛选。