比色法快速测定乳酸菌谷氨酸脱羧酶活力及其应用

被引：44

作者：

许建军

江波

许时婴

不详

机构：

[1] 江南大学食品学院

[2] 江南大学食品学院无锡

[3] 无锡

来源：

微生物学通报 | 2004年 / 02期

关键词：

乳酸菌; 谷氨酸脱羧酶(GAD); γ-氨基丁酸(GABA); 比色法;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.2004.02.016

中图分类号：

Q55 [酶];

学科分类号：

071010 ; 081704 ;

摘要：

基于Berthelot显色测定ω 氨基酸的反应 ,探讨了比色法快速测定谷氨酸脱羧酶活力的测定条件。结果表明 ,该方法灵敏度较高 ,重现性好 ,成本低 ,快捷 ,可替代氨基酸分析仪分析法。对乳酸菌谷氨酸脱羧酶提取液的适宜反应底物体系为 0 2mol LMacIlvaine ,pH4 7,内含 0 1mmol LPLP (5 磷酸吡哆醛 ) ,1 0mmol L底物L MSG (L 谷氨酸钠 )。 2 0 0 μL底物溶液和 1～ 1 0 0 μL酶液在 3 0℃反应 ,然后冰浴中加入 2 0 0 μL 0 2mol L硼酸缓冲液 (pH9 0 )终止反应 ,再加入 1mL 6%苯酚和 40 0 μL次氯酸钠 ,沸水浴加热 1 0min后 ,迅速冷却 2 0min ,在 63 0nm测定吸光值 ,酶反应产物γ 氨基丁酸的定量以标准曲线确定 ,同时探讨了该方法的应用

引用

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