猪流感病毒分型基因芯片的建立和初步应用

被引:22
作者
陈红军 [1 ]
侯义宏 [1 ]
白华 [1 ]
陈桂来 [2 ]
吴时友 [2 ]
尹燕博 [2 ]
钱永华 [1 ]
田振宇 [2 ]
机构
[1] 西北农林科技大学动物科技学院
[2] 山东澳兰生物工程研究院
关键词
猪流感病毒; 基因芯片; 多重PCR; 核酸杂交;
D O I
暂无
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
090507 [智慧养殖与动物生产学];
摘要
根据流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)亚型基因序列间的差异性,分别设计H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据M基因设计A型流感病毒的通用引物。RT-PCR扩增猪流感病毒各亚型HA、NA和M基因的特异片段,克隆至pMD18-T构建重组质粒,制备探针。将各探针按一定的阵列点加到硝酸纤维素膜上,制成基因芯片。并对217份不同地区的样品进行检测。结果表明:该芯片可以同时检测待检样品中5种亚型A型流感病毒,并显示了较高的灵敏度和特异性,灵敏度比PCR高1个稀释度,比病毒分离高2个稀释度。该方法的建立为猪流感的检测及猪流感病毒各亚型在猪群中的流行病学调查提供了一种快速、灵敏和高通量的手段。
引用
收藏
页码:708 / 712
页数:5
相关论文
共 3 条
[1]
表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因重组伪狂犬病病毒的构建 [J].
周国辉 ;
倪健强 ;
田志军 ;
仇华吉 ;
李海燕 ;
童光志 .
畜牧兽医学报, 2005, (10) :1043-1048
[2]
山东猪流感病毒H9N2亚型毒株的分离鉴定 [J].
范伟兴 ;
许传田 ;
赵宏坤 ;
徐龙涛 ;
孙中诚 ;
禚宝山 .
中国动物检疫, 2003, (08)
[3]
部分省市猪群猪流感的血清学调查及猪流感病毒的分离与鉴定 [J].
李海燕 ;
于康震 ;
辛晓光 ;
李雁冰 ;
蔡雪辉 ;
杨焕良 ;
毕英佐 ;
王自振 .
动物医学进展, 2003, (03) :67-72