siRNA沉默Smad3对人KFB细胞增殖、凋亡及合成MMP3的影响

被引:6
作者
刘波
张恒术
果磊
机构
[1] 重庆医科大学第一附属医院烧伤与整形美容外科临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室
关键词
RNA干扰; Smad3; 瘢痕疙瘩; 成纤维细胞;
D O I
暂无
中图分类号
R622 [整形手术学];
学科分类号
100224 [整形外科学];
摘要
目的研究siRNA特异性沉默Smad3基因对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloidfibroblast,KFB)增殖、凋亡及合成基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase3,MMP3)的影响。方法设计合成3对Smad3特异性siRNA片段(Smad3-siRNA-Y1,Y2,Y3)和1对无关干扰片段,转染人KFB细胞,RT-PCR和Western blot方法检测Smad3-siRNA片段对Smad3基因的特异性沉默效果,MTT法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的变化,免疫细胞化学法检测MMP-3表达量的变化。结果75nmol/L Smad3-siRNA-Y1处理KFB细胞48小时后可特异并有效地抑制Smad3基因的表达;抑制细胞增殖,使S期细胞减少,G0/G1期细胞增多;凋亡指数增加;细胞表达MMP-3增加。结论Smad3-siRNA可特异性抑制KFB细胞中Smad3基因表达,明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,并加快其合成MMP3。
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页码:301 / 306+310 +310
页数:7
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