银杏苦内酯B对内毒素血症幼鼠肠道的保护作用

目的胃肠功能障碍与严重感染引起的肠屏障功能破坏密切相关。通过应用血小板活化因子(platelet activating factor,pAF)受体拮抗剂银杏苦内酯B(Ginkgolide B)对幼年大鼠内毒素血症小肠上皮细胞形态学及二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)的影响,探讨PAF在内毒素血症肠损伤中的作用。方法18日龄Wistar大鼠,随机分为内毒素(lipopolysaccharide,LPS)组和PAF受体拮抗剂组(预防组和治疗组)及对照组(每一时相点n=8),注射LPS后1.5,3,6,24,48,72 h取回肠。LPS组和对照组分别腹腔注射内毒素5 mg/kg及生理盐水1ml/kg;预防组和治疗组分别于每一时相点注射LPS前、后30min腹腔注射PAF受体拮抗剂BN52021(Ginkgolide B)5 mg/kg。苏木精-伊红染色及透射电镜作形态学检查。采用分光光度计法分别测定回肠组织及血中DAO含量。根据数据的正态性和方差齐性,选择单因素方差分析ANOVA比较多组间差别,最小显著差异法LSD(least significant difference)-t检验比较两组间差别。所有实验在本院动物实验室、病理实验室、生化实验室及辽宁中医药科大学电镜室进行。结果1.5,3,6,24 h LPS组可见绒毛水肿,固有层血管充血,间质淋巴管扩张,肠腔炎性渗出;拮抗剂组可见绒毛水肿。电镜下对照组肠微绒毛及细胞间紧密连接未见异常。实验组上皮细胞连接增宽,微绒毛变细、稀疏,部分断裂、脱落;细胞器受损。拮抗剂组改变较实验组减轻。LPS组回肠DAO水平明湿低于对照组,6 h从对照组(0.172±0.004)U/mg降至(0.096±0.010)U/mg(F=13.372,P<0.01);LPS组血浆DAO水平明显高于对照组。预防组及治疗组变化趋势同LPS组。结论PAF在内毒素血症肠道屏障功能损伤中可能起一定作用,预防和治疗性应用PAF受体拮抗剂Ginkgolide B可减轻肠损伤。血浆和小肠组织中DAO活性同步变化,故测定血浆DAO活性可早期、敏感地反映小肠黏膜功能的破坏。