中东呼吸综合征冠状病毒N蛋白的原核表达、纯化和鉴定

被引：6

作者：

王延群 ^{[1
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郝春绪 ^{[2
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邓瑶 ^{[1
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杨扬 ^{[1
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赵莉 ^{[1
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沈晓玲 ^{[2
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谭文杰 ^{[1
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机构：

[1] 中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所

[2] 内蒙古医科大学基础医学院微生物学教研室

来源：

中华微生物学和免疫学杂志 | 2014年 / 34卷 / 10期

关键词：

中东呼吸综合征冠状病毒; 核衣壳蛋白; 原核表达; 纯化; 鉴定;

D O I：

暂无

中图分类号：

R373 [人体病毒学（致病病毒）];

学科分类号：

摘要：

目的对中东呼吸综合征冠状病毒(middle east respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid,N)进行原核表达、纯化和鉴定,了解其免疫原性。方法通过人工合成N基因,构建重组质粒pET30a-MERS-CoV-N,然后转化E coli BL21(DE3),利用IPTG进行诱导表达,并优化确定表达条件;采用镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western blot验证。结果原核表达成功并纯化获得与预期大小(46×10～3)一致的高纯度可溶性N蛋白。Western blot表明重组蛋白可与免疫阳性兔血清及His标签抗体发生特异性反应,但与北京地区2008年收集的30份成人血清无反应。结论 MERS-CoV的N蛋白成功在原核系统中实现表达并纯化、鉴定,为MERS-CoY的免疫学诊断和免疫原性研究奠定了基础。

引用

页码：764 / 769

共 12 条

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