重组干扰素γ的中间试制

用带有表达质粒ｐＢＶ２２０（含有γ干扰素基因）的大肠杆菌ＤＨ５α株进行发酵培养，３批中试的菌产量平均为１４．１克／Ｌ，γ干扰素的表达量平均为１．０２×１０９ＩＵ／Ｌ，收集的菌体经高压匀质破菌后收集包涵体，用７ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍提取干扰素，此过程可去除７８．４％菌体蛋白，而干扰素活性仅损失１０．４１％，粗制干扰素经复性可使干扰素活性提高４０５％，比活也有明显提高，３批平均为１．７６×１０７ＩＵ／ｍｇ蛋白，复性γ干扰素用三步柱层析法进行纯化，其其得率平均为２８．１３％，其比活分别为３．２２、２．７８和３．０１×１０７ＩＵ／ｍｇ蛋白。３批中试的纯化γ干扰素纯度在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定均＞９９％，高效液相层析（ＨＰＬＣ）测定＞９８％，其它检定项目也均合乎规程要求。