人Mn SOD cDNA的克隆及高效表达

被引：17

作者：

施惠娟

贺华君

魏东芝

袁勤生

陈哲宇

李明峰

吴祥甫

机构：

[1] 中国科学院上海生物化学研究所!上海,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,生物化学研究所!上海,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,生物化学研究所!上海,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,生物化学研究所!上海,华东理工大学生

来源：

生物化学与生物物理学报 | 1999年 / 06期

关键词：

锰超氧化物歧化酶; 表达载体; 基因克隆; 基因表达; 大肠杆菌;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q986 [分子人类学];

学科分类号：

摘要：

用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ），以人肝细胞株（Ｌ０２）总ＲＮＡ为模板，扩增了人锰超氧化物歧化酶（ｈＭｎＳＯＤ）的ｃＤＮＡ，重组到Ｔ７启动子控制下的表达载体ｐＥＴ２４ａ（＋）中，构建表达质粒ｐＥＴＭｎＳＯＤ，并转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）。ＳＤＳＰＡＧＥ及蛋白质印迹分析表明，经１ｍｍｏｌ／Ｌ异丙基硫代 β Ｄ半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导后，可高效表达一分子量为２２ｋＤ的蛋白质，与抗人ＭｎＳＯＤ多抗有特异的免疫反应，表达量约为菌体总蛋白质的５０％，具有特异性ＳＯＤ酶活性，酶比活可达３８７．５ｕ／ｍｇ。

引用

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