枯草杆菌和大肠杆菌间通过原生质体融合的质粒pHV33的转移

被引:7
作者
薛青
盛祖嘉
沈仁权
机构
[1] 复旦大学遗传学研究所
[2] 复旦大学遗传学研究所 上海
[3] 上海
关键词
大肠杆菌; 大肠埃希氏菌; 埃希氏杆菌属; 原生质体融合; 细胞融合; pHV33; 枯草杆菌; 质粒; 基因载体;
D O I
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学科分类号
摘要
用带有质粒pHV 33(ApR TcR CmR,由大肠杆菌质粒pBR 322片段和金黄色葡萄球菌质粒pC194片段联接成的嵌合质粒)的大肠杆菌SK1592和枯草杆菌FD1980(trp- SmR RifR)作为亲本,在DNase1始终存在的条件下制备原生质体,并经PEG诱导融合,在含Sm、Rif、Cm的高渗培养基上获得融合子。融合子在菌落形态、产芽孢、染色标记等十几项特征上都和枯草杆菌亲本相同,唯一相同于大肠杆菌亲本的便是质粒pHV33的CmR特征。用融合子的DNA抽提物转化大肠杆菌,获得ApR、TcR、CmR转化子。相反方向的转移没有成功。质粒pHV33在融合子和枯草杆菌中都较不稳定。和有关文献报道一致,质粒有关的抗性ApR、TcR和CmR在大肠杆菌中都能表达,但是在枯草杆菌中则只有CmR得以表达。
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