富集液中六六六(γ-BHC)脱氯基因的克隆、表达及降解试验

被引：5

作者：

张国顺

洪青

马爱芝

张晓舟

李顺鹏

机构：

[1] 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

[2] 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京

[3] 南京

来源：

微生物学报 | 2005年 / 01期

关键词：

富集液; 六六六脱氯基因; 克隆和表达;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.2005.01.011

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp的基因片段 ,命名为linN ,测序结果表明linN与报道的脱氯基因linA和linA2的同源性达 99% ,与linA1的同源性达 97%。将linN定向克隆到pET 2 9α表达载体中 ,转化至E .coliBL2 1,经IPTG诱导后可表达分子量约 17kD的蛋白 ,表达产物占菌体总蛋白的 30 %左右 ;诱导后转化子的降解能力明显提高 ,粗酶也有很好的降解效果 ,为进一步分离纯培养和构建多功能农药残留降解菌提供了基础

引用

页码：44 / 47

页数：4

共 7 条

[1] 耐盐及苯乙酸、甲基对硫磷降解基因工程菌的构建 [J].

刘智 ;

洪青 ;

徐剑宏 ;

张国顺 ;

李顺鹏 .

微生物学报, 2003, (05) :554-559

[2] 1，2，4－三氯苯在土壤中的降解 [J].

何耀武，孙铁珩，区自清 .

应用生态学报, 1996, (04) :429-434

[3]

分子克隆实验指南[M]. 科学出版社 , (美)J.萨姆布鲁克（JosephSambrook）,（美）D.W.拉塞尔（DavidW.Russell）著, 2002

[4]

新农药应用指南[M]. 中国林业出版社 , 张文吉主编, 2000

[5]

农药化学[M]. 南开大学出版社 , 唐除痴等编著, 1998

[6] Enhanced degradation of hexachlorocyclohexane isomers in rhizosphere soil of Kochia sp [J].

Singh, N .

BULLETIN OF ENVIRONMENTAL CONTAMINATION AND TOXICOLOGY, 2003, 70 (04) :775-782

[7]

Complete analysis of genes and enzymes for γ-hexachlorocyclohexane degradation in Sphingomonas paucimobilis UT26[J] . Y Nagata,K Miyauchi,M Takagi.Journal of Industrial Microbiology ＆ Biotechnology . 1999 (4-5)

← 1 →