里氏木霉内切葡萄糖苷酶Ⅳ在毕赤酵母中的表达

被引:18
作者
汤新
刘刚
田生礼
张煜
邢苗
机构
[1] 深圳大学生命科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室
关键词
纤维素酶; 内切葡萄糖苷酶Ⅳ; 里氏木霉; 毕赤酵母;
D O I
10.13344/j.microbiol.china.2005.06.010
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
进行了内切葡萄糖苷酶Ⅳ(EGⅣ)在毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统中的表达。采用RT-PCR的方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)中分离到eg4基因。将eg4基因与毕赤酵母表达载体pPICZαA连接,得到重组质粒pPICZαA-eg4。将该重组质粒线性化后转化毕赤酵母GS115,eg4基因通过同源重组被整合到毕赤酵母的染色体上,并处于酵母α因子的下游,得到重组菌株P.pastoris-EGⅣ1。在甲醇诱导下,重组菌株P.pastoris-EGⅣ1可以合成并分泌EGⅣ,培养液的CMC活力达到2.11 U/mL。
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