大肠埃希菌O157:H7环介导等温扩增可视化检测方法的建立

被引：11

作者：

吕恒

张锦海

陈凤娟

谭维国

顾海涛

王平

王长军

机构：

[1] 南京军区疾病预防控制中心

来源：

中国病原生物学杂志 | 2013年 / 8卷 / 04期

关键词：

肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157︰H7; 可视化检测; 环介导等温扩增(LAMP); 羟基萘酚蓝(HNB);

D O I：

10.13350/j.cjpb.2013.04.001

中图分类号：

R378.21 [];

学科分类号：

摘要：

目的建立肠出血性大肠埃希菌O157︰H7环介导等温扩增(LAMP)可视化快速检测方法。方法针对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157︰H7编码脂多糖rfbE基因保守区设计LAMP引物及环引物,反应体系加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,结合LAMP浊度仪优化扩增条件,根据HNB的颜色变化进行结果判定,评价LAMP方法的特异性和灵敏性。结果建立的LAMP法对O157︰H7rfbE基因的最低检出限约为100copy/反应管,检测肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)、肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)、宋内志贺菌、福氏志贺菌均为阴性。体系的扩增效率较高,可在40min内出结果。结论建立的基于颜色判定的EHEC O157︰H7LAMP检测方法具有特异、灵敏,设备要求简单等特点,适用于EHEC O157︰H7的快速检测。

引用

页码：289 / 292+309 +309

页数：5

共 9 条

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