黄曲霉毒素B完全抗原合成及鼠源多抗血清的制备

被引:7
作者
魏继涛 [1 ,2 ]
胡延春 [2 ]
宁红梅 [3 ]
银梅 [3 ]
岳锋 [1 ]
贾文科 [1 ]
田献礼 [3 ]
王选年 [1 ,3 ]
机构
[1] 新乡学院生物技术研究中心
[2] 四川农业大学动物医学院
[3] 河南科技学院动物科学学院
关键词
黄曲霉毒素B1; 完全抗原; 多抗血清;
D O I
暂无
中图分类号
S852.4 [家畜免疫学];
学科分类号
090602 ;
摘要
为了合成黄曲霉毒素B1(AFB1)完全抗原,制备鼠源AFB1多克隆抗体血清。通过琥珀酰亚胺酯法在黄曲霉毒素B1(AFB1)分子上引入羧基,生成黄曲霉毒素B1肟(AFB1O)。用EDC法和DCC法合成AFB1-BSA和AFB1-OVA。采用薄层层析技术、紫外光谱技术(Uv)、SDS-PAGE鉴定完全抗原的合成。通过免疫BALB/c小鼠,获得鼠原多克隆血清,采用间接ELISA方法测定多抗血清的免疫效价,用竞争ELISA检测多克隆血清的敏感性和特异性。结果表明:免疫小鼠血清效价都在1:3200以上,其中6号鼠效价最高,到达1.28×10-4,敏感性好,半数抑制浓度IC50为22.268 ng/mL,交叉反应率低。本研究成功制备了AFB1完全抗原,获得了敏感的AFB1多克隆抗体血清,为以后制备AFB1单克隆抗体及免疫学快速检测方法奠定了基础。
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