高温大曲中产耐热性蛋白酶芽孢杆菌的筛选和鉴定

被引:22
作者
马校卫 [1 ,2 ]
颜林春 [1 ,2 ]
汤二将 [1 ,2 ]
龚丽琼 [1 ,2 ]
黄祖新 [1 ,2 ,3 ,4 ]
机构
[1] 福建师范大学生命科学学院
[2] 农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室
[3] 农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室
[4] 发育与神经生物学福建省高等学校重点实验室
关键词
高温大曲; 苏云金芽孢杆菌; 蛋白酶; 16SrDNA; 响应面法;
D O I
10.13386/j.issn1002-0306.2012.15.032
中图分类号
TQ925.2 [];
学科分类号
摘要
从高温大曲样品中通过分离纯化,在牛奶琼脂平板上初筛得到产耐热性蛋白酶的菌株,然后液体发酵培养测定蛋白酶酶活挑选出产酶较强的菌株A1。在经过菌株形态特征、生化鉴定、16SrDNA分子生物学鉴定为芽孢杆菌属苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。选择三个主要影响因子葡萄糖、酵母浸出粉和pH,运用响应面法优化发酵培养基,最佳产酶培养基为pH为8.4,葡萄糖添加量为1.092%,酵母浸出粉添加量为0.902%,最佳酶活力为142.81u/mL。测定蛋白酶酶作用的最适温度是61℃,且在55~70℃之间有较高的酶活力,60℃相对酶活为97.63%。
引用
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