支架蛋白活化蛋白激酶C受体1在胃癌细胞中的表达及其与胃癌细胞增殖的关系

被引：2

作者：

刘超 ^{[1
]}

任丽莉 ^{[2
]}

王一曌 ^{[1
]}

刘乙蒙 ^{[1
]}

肖建英 ^{[3
]}

机构：

[1] 锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室

[2] 锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室

[3] 锦州医科大学教务处

来源：

解剖学报 | 2017年 / 48卷 / 05期

关键词：

蛋白激酶1活化受体; 胃癌细胞; 增殖; HGC27细胞; 免疫印迹法;

D O I：

10.16098/j.issn.0529-1356.2017.05.008

中图分类号：

R735.2 [胃肿瘤];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

目的探讨活化蛋白激酶C受体1C(RACK1,GNB2L1)在胃癌细胞HGC27中的表达及过表达RACK1对HGC27生长增殖的影响。方法体外培养胃癌未分化细胞HGC27和正常胃黏膜上皮细胞系GES-1,收集细胞48 h后,提取mRNA和蛋白,利用RT-PCR检测RACK1 mRNA在HGC27和GES-1细胞中的表达;利用Western blotting法检测RACK1蛋白在两种细胞中的表达;以人胚肾HEK293细胞c DNA为模板,构建pc DNA3.1Aflag-RACK1重组质粒,利用Lipo2000转染入HGC27细胞中,Western blotting法检测质粒的转染效率,MTT法检测过表达RACK1对HGC27胃癌细胞系生长增殖的影响。结果 HGC27胃癌细胞中RACK1的mRNA和蛋白水平表达低于GES-1细胞(P<0.01)。双酶切鉴定和测序分析表明,pc DNA3.1A-flag-RACK1重组质粒构建成功。将该质粒转入HGC27细胞后,与未转染组相比,空载转染组RACK1蛋白表达无明显区别(P>0.05),pc DNA3.1-RACK1转染组RACK1蛋白表达明显升高(P<0.01);转染pc DNA3.1A-flag-RACK1转染组细胞存活率在72 h和96 h明显少于pc DNA3.1空载对照组(P<0.01)。结论支架蛋白RACK1的mRNA和蛋白水平在HGC27细胞中低表达,上调RACK1的表达可明显抑制HGC27细胞增殖。

引用

页码：545 / 549

页数：5

共 9 条

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