砷剂和沙利度胺单用及联用对人骨髓增生异常综合征荷瘤小鼠抗瘤作用的研究

目的探讨砷剂(arsenictrioxide,ATO)和沙利度胺(thalidomide,THAL)单用及联用在人骨髓增生异常综合征(MDS)荷瘤小鼠体内抗瘤作用及其机制。方法(1)建立动物模型:取对数生长期人MDS细胞株MUTZ-1细胞接种于第一代4～6周龄SCID小鼠和裸鼠(BALB/CA-nμde)的肩胛皮下;用组织病理学、免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)、流式细胞术免疫学、染色体分析等方法对荷瘤组织来源及其生物学特性进行鉴定。动物传代,观察第二代61只SCID小鼠和8只裸鼠的成瘤率和成瘤潜伏期。(2)动物实验:随机取56只MDS荷瘤小鼠,分为治疗组40只(ATO、THAL单用及联用)和对照组16只(生理盐水和未治疗);用病理学、IHC、微血管密度计数(microvesseldensitycount,MVD)、DNA凝胶电泳、PI染色、TUNEL染色等多参数方法,观察药物对各组荷瘤小鼠生长、瘤体大小、生存期、存活率及细胞凋亡等影响。结果(1)动物模型的建立:SCID小鼠成瘤率(98.4%,60/61)明显高于裸鼠(62.5%,5/8)(P=0.0027);SCID小鼠成瘤潜伏期(中位数12d)较短;而裸鼠潜伏期明显延长(中位数26d)(Z=4.605,P<0.001)。荷瘤组织的来源鉴定结果证实为人源性的、保持了原细胞系(MUTZ-1细胞)生物学特性,表明动物模型建立成功。(2)动物体内实验:与对照组比较,大剂量ATO(7.5μg)单用有较强的抑制荷瘤生长(F=146.94,P=0.000)和诱导凋亡作用(F=30.10,P=0.000),但副作用较大,小鼠难以耐受;小剂量ATO(5.0μg)单用亦有明显的抑瘤作用和诱导细胞凋亡作用、副作用较轻,小鼠平均生存期较长(F=25.11,P<0.01)、疗效较好。大剂量ATO与THAL联用副作用大、小鼠平均生存期较短(P<0.01),疗效不佳。THAL单用抑瘤有效,但显效较迟缓,其机制并非诱导细胞凋亡(P>0.05),而可能与抑制血管生成机制有关。结论(1)成功建立人MDS-SCID荷瘤小鼠模型;(2)小剂量(5.0μg)ATO在MDS荷瘤小鼠体内抑瘤有效、副作用较轻,能延长荷瘤小鼠生存期、提高存活率,其机制与诱导细胞凋亡有关。