骨髓间充质干细胞在溃疡性结肠炎大鼠模型体内的示踪研究

被引：11

作者：

曹丹

范恒

唐庆

寿折星

刘星星

左冬梅

邹舟

机构：

[1] 华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科

来源：

华中科技大学学报(医学版) | 2014年 / 43卷 / 02期

关键词：

骨髓间充质干细胞; 绿色荧光蛋白; SRY基因; 溃疡性结肠炎; 示踪;

D O I：

暂无

中图分类号：

R574.62 [结肠疾病];

学科分类号：

100201 [内科学];

摘要：

目的追踪骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在溃疡性结肠炎大鼠模型体内的归巢情况,为BMSCs移植治疗溃疡性结肠炎提供实验基础。方法体外培养扩增Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定BMSCs,采用慢病毒载体介导的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)技术(lentivirus-GFP)对BMSCs进行荧光蛋白标记(Ad-GFP-BMSCs)。SD雌性大鼠被随机分为3组:空白组、模型组、Ad-GFP-BMSCs组。2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)诱导溃疡性结肠炎,疾病活动指数(disease activity index,DAI)对各组大鼠进行评估,采用性别交叉移植的方法,尾静脉注射Ad-GFP-BMSCs于雌性大鼠体内,1周后收集结肠标本,对结肠标本进行病理学评估,免疫荧光检测结肠组织GFP表达,PCR检测Y染色体的性别决定区(sex-determining region on the Y chromosome,SRY)基因。结果 TNBS能成功诱导溃疡性结肠炎,与模型组相比,Ad-GFP-BMSCs组DAI评分显著下降(P<0.05)。Lentivirus-GFP成功标记SD大鼠的BMSCs,转染后BMSCs能够稳定表达GFP蛋白,尾静脉注射1周,Ad-GFP-BMSCs组免疫荧光可检测到GFP表达,PCR可检测出SRY基因,空白组和模型组无GFP和SRY基因表达。结论慢病毒载体介导的GFP转染技术和SRY基因可以追踪移植的BMSCs,而且BMSCs通过尾静脉注射可以归巢于受损的结肠组织,这可能为BMSCs移植治疗溃疡性结肠炎提供实验基础。

引用

页码：142 / 147

页数：6

共 10 条

[1]

Robo1 RNA干扰慢病毒载体的构建及其基因沉默效应 [J].

李彩娟 ;

柯昌斌 ;

田玉科 ;

时代 ;

何文胜 ;

卜慧莲 ;

高峰 .

华中科技大学学报(医学版), 2013, 42 (01) :42-45+50

[2]

大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体的构建与鉴定 [J].

逄坤芳 ;

陈鹤翔 ;

杨辉 ;

卜慧莲 ;

刘希江 .

华中科技大学学报(医学版), 2012, 41 (03) :329-332+352

[3]

联苯胺法检测大便隐血试剂的改进附视频 [J].

李碧芳 ;

刘素兰 ;

杨晓晖 ;

王光华 .

川北医学院学报, 2000, (04) :86

[4]

Mesenchymal Stem Cells as Therapeutics.[J].Biju Parekkadan;Jack M. Milwid.Annual Review of Biomedical Engineering.2010,

[5]

Exogenous administration of mesenchymal stem cells ameliorates dextran sulfate sodium-induced colitis via anti-inflammatory action in damaged tissue in rats.[J].Fumio Tanaka;Kazunari Tominaga;Masahiro Ochi;Tetsuya Tanigawa;Toshio Watanabe;Yasuhiro Fujiwara;Kensuke Ohta;Nobuhide Oshitani;Kazuhide Higuchi;Tetsuo Arakawa.Life Sciences.2008, 23

[6]

Gene delivery by lentivirus vectors [J].