转译起始密码子周边序列的改变对Δ6-脂肪酸脱氢酶基因表达的影响

被引：4

作者：

张琦

李明春

孙颖

马海庭

邢来君

孙红妍

任勇

机构：

[1] 南开大学微生物学系

[2] 南开大学微生物学系天津

[3] 云南大学微生物研究所教育部微生物资源开放研究重点实验室昆明

[4] 天津

来源：

微生物学报 | 2004年 / 04期

基金：

高等学校骨干教师资助计划;

关键词：

少根根霉; Δ6-脂肪酸脱氢酶基因; 转译起始密码子; 酿酒酵母; γ-亚麻酸; 表达;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.2004.04.030

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

将少根根霉中Δ6_脂肪酸脱氢酶基因（RAD6 ）的起始密码子周边序列作适当的修改 ,并把修改后获得的片段（RAD61 ）亚克隆到表达载体pYES2 0 ,构建重组表达载体pYRAD61。经测序验证 ,把pYRAD61转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达分析 ,同时以空载体pYES2 0和出发序列所构建的pYRAD6作为对照。通过气相色谱（GC）和气相色谱质谱（GCMS）分析表明 ,在pYRAD6和pYRAD61转化的酿酒酵母中生成γ_亚麻酸 ,而pYES2 0中没有检测到。其中 ,pYRAD61转化的酿酒酵母γ_亚麻酸表达量占细胞总脂肪酸含量的 5 2 3% ,而对照pYRAD6转化的酿酒酵母中表达量只占 2 6 4 %。

引用

页码：536 / 539

页数：4

共 6 条

[1] 高山被孢霉ATCC16266Δ-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达 [J].

刘莉 ;

李明春 ;

胡国武 ;

葛军 ;

张丽 ;

程志晖 ;

邢来君 .

生物工程学报, 2001, (02) :161-164

[2] γ-亚麻酸研究进展 [J].

吴定 ;

路桂红 .

中国乳品工业, 1997, (03) :36-38

[3] 酵母完整细胞快速高效转化法 [J].

毛小洪 ;

蔡金科 .

生物工程学报, 1990, (02) :102-107

[4] Differential response to low temperature of two Δ6 fatty acid desaturases from Mucor circinelloides [J].

Michinaka, Y ;

Aki, T ;

Shimauchi, T ;

Nakajima, T ;

Kawamoto, S ;

Shigeta, S ;

Suzuki, O ;

Ono, K .

APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY, 2003, 62 (04) :362-368

[5] OPTIMIZING THE EXPRESSION OF CHIMERIC GENES IN PLANT-CELLS [J].

TAYLOR, JL ;

JONES, JDG ;

SANDLER, S ;

MUELLER, GM ;

BEDBROOK, J ;

DUNSMUIR, P .

MOLECULAR & GENERAL GENETICS, 1987, 210 (03) :572-577

[6]

Differential response to low temperature of two Delta6 fatty acid desaturases from Mucor circinelloides. Michinaka Y, Aki T, Shimauchi T, et al. Applied Microbiology and Biotechnology . 2003

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