脾虚模型大鼠肠道菌群分布及时效性研究

目的应用肠道微生物16S rDNA测序技术探讨脾虚对肠道微生物的影响及时效性。方法将48只大鼠随机分为对照组和脾虚组,每组又分为2、10、16周3个时间点,每组每个时间点8只大鼠,雌雄各半。脾虚组采用饮食不节加力竭游泳法建立脾虚模型。分别于0、2、10、16周时检测雌雄大鼠体重,于2、10、16周时检测大鼠尿D-木糖排泄率、血清淀粉酶活力。采用肠道菌群Beta多样性分析、Alpha多样性分析比较对照组和脾虚组不同时间点肠道微生物丰度和物种组成变化情况。结果与对照组同时间相比,脾虚组2、10、16周时雌、雄性大鼠体重均显著减轻(P<0.05或P<0.01);脾虚组2、10、16周时大鼠尿D-木糖排泄率显著降低,2、10周时血清淀粉酶亦降低(P<0.05或P<0.01)。16S rDNA测序结果显示,肠道菌群Beta多样性分析中线性判别分析(LDA)>2且在该组中丰度显著高的差异物种对照组有8种,脾虚组2周时有14种,10周时有27种,16周有8种。Alpha多样性分析结果:与对照组相比,脾虚组2、10周时大鼠肠道微生物ACE、Observed指数呈上升趋势,16周时有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。脾虚组16周时大鼠ACE、Observed指数显著低于本组2、10周(P<0.05)。与对照组相比,脾虚组2周时大鼠肠道菌群α-变形菌纲水平显著升高(P<0.01)。与脾虚组2周时相比,脾虚组10、16周时α-变形菌纲和放线菌纲水平下降(P<0.05或P<0.01),各时间点疣微菌纲差异无统计学意义(P>0.05)。结论脾虚条件下大鼠体重减轻,代谢功能降低,其发生机制可能与肠道菌群丰度及物种数量变化相关,且脾虚状态可随时间变化逐渐减轻。