甲胺磷单克隆抗体制备及鉴定

被引:17
作者
赵肃清
孙远明
张春艳
机构
[1] 华南农业大学食品学院
[2] 中山医科大学免疫学教研室
基金
广东省自然科学基金;
关键词
甲胺磷; 单克隆抗体; 制备; 鉴定;
D O I
10.13431/j.cnki.immunol.j.20030039
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
目的 制备并鉴定甲胺磷农药单克隆抗体。方法 用 5 0 0mg/mLPEG 4 0 0 0作融合剂进行细胞融合 ,HAT(H ,次黄嘌呤 ;A ,氨基喋呤 ;T ,胸腺嘧啶 )培养基选择性培养 ,自制的显微操作装置进行亚克隆。用间接ELISA(酶联免疫吸附测定)和间接竞争ELISA方法对 2株细胞进行鉴定 ,并测定与其它农药的交叉反应率。结果 得到 2株稳定分泌甲胺磷抗体的单克隆细胞株 ,命名为 1C3和 2C6 ;间接ELISA法表明 2株细胞与载体牛血清蛋白质 (Bovineserumalbumin ,BSA)和卵清蛋白质 (Oval bumin ,OVA)反应成阴性 ;间接竞争ELISA法表明 2株细胞上清液内的抗体可以竞争性地与甲胺磷结合 ;2株单克隆细胞均系IgG1亚类 ;1C3细胞诱导腹水纯化后的抗体与其它有机磷农药几乎没有交叉反应。结论 成功制备 2株分泌抗甲胺磷抗体的单克隆细胞株 ,并可用于检测甲胺磷的研究
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