成人破骨细胞的体外培养

目的　建立成人破骨细胞体外培养的方法 ,观察成骨细胞对破骨细胞分化、增殖和功能的影响 ,为进一步研究补肾中药防治骨溶解和骨质疏松症提供基础。材料和方法　从成人骨髓中提取单核细胞 ,以 1,2 5 (OH) 2 D3 作为刺激因子 ,分 3组培养 :单核细胞与成骨细胞共同培养 ,单核细胞单独培养 ,单核细胞与成骨细胞条件培养液培养。生物显微镜下观察细胞的分化过程 ,HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶 (Trap)染色方法作组织化学观察 ,扫描电镜 (SEM)观察骨吸收功能。 结果　在单核细胞与成骨细胞共同培养组 ,可见单核细胞逐步融合成多核细胞 ;HE染色和Trap染色可见阳性多核细胞 ;扫描电镜观察可见骨片上有骨吸收陷窝形成。其他两组则未得到上述结果。结论　成人骨髓单核细胞在一定培养条件下能分化成熟为具有典型的破骨细胞表型的多核细胞 :Trap染色阳性 ,具有骨吸收功能。与成骨细胞的直接接触是破骨细胞分化、增殖和发挥功能的必不可少的条件。