双价杀虫蛋白基因在荧光假单胞菌中的表达及增效

被引：7

作者：

丁之铨

张杰

宋福平

黄大昉

李季伦

机构：

[1] 中国农业科学院植物保护研究所!北京

[2] 中国农业科学院生物技术研究中心!北京

[3] 中国农业大学生物学院!北京

来源：

微生物学报 | 2000年 / 06期

关键词：

荧光假单胞菌; 杀虫晶体蛋白; cry1 Ac基因; cry2 Aa基因; 增效作用;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.2000.06.002

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

摘要：

利用广宿主质粒载体 pJMS6α lac将苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)杀虫晶体蛋白基因cry1Ac和cry2Aa基因分别及一起进行克隆 ,将重组质粒导入能在多种作物上定殖、对植物病菌有良好抑菌和防治作用的荧光假单胞菌 (Pseudomonasfluorescens)P30 3菌株 ,分别得到工程菌株IPP1 0 1、IPP2 0 1和IPP2 0 2。PCR RFLP和Southernblot检测均证明目的基因已经导入了工程菌。SDS PAGE电泳显示工程菌中存在明显的Cry1Ac蛋白带 ;透射电镜观察发现含cry1Ac基因的两个菌株IPP1 0 1和IPP2 0 2中杀虫蛋白形成了典型的菱形晶体和蛋白包含体 ,而在野生P30 3菌株中均无这些结构。这些结果说明 ,工程菌中cry1Ac基因得到了很好表达。室内杀虫试验表明 :工程菌对棉铃虫初孵幼虫的致死中浓度 (LC50 ) ,只含cry1Ac的IPP1 0 1为 0 0 0 81 2mL/g饲料 ,只含cry2Aa的IPP2 0 1为 0 0 2 60 4mL/g饲料 ,含双基因的IPP2 0 2为 0 0 0 1 86mL/g饲料 ;HD73为 0 0 0 1 70mL/g饲料。cry1Ac和cry2Aa双基因表达产物具有显著增效作用 ,共毒系数达 332 8。

引用

收藏

页码：573 / 578

页数：6

相关论文

共 6 条

[1] 苏云金芽孢杆菌cry基因PCR-RFLP鉴定体系的建立 [J].

宋福平 ;

张杰 ;

谢天健 ;

杨自文 ;

戴莲韵 ;

李国勋 .

中国农业科学, 1998, (03) :13-18

[2] 苏云金芽孢杆菌δ-内毒素cryIA(c)基因在大肠杆菌和变铅青链霉菌中表达 [J].

杨闰英 ;

胡志浩 ;

邓子新 ;

李季伦 .

生物工程学报, 1998, (02) :3-8

[3] 苏云金芽孢杆菌cry1基因在荧光假单胞菌Pfx-18中的表达特性 [J].

刘子铎 ;

汤江武 ;

喻凌 ;

孙明 ;

喻子牛 .

微生物学报, 1998, (01) :1-5

[4] 用电激转化法构建杀虫防病荧光假单胞菌 [J].

张光焰，张杰，彭于发，赵建周，陈彩层，徐樱，黄大 .

中国农业科学 , 1995, (04) :8-13

[5] 用接合转移方法构建杀虫防病荧光假单胞菌 [J].

张杰，彭于发，赵建周，陈彩层，黄大 .

农业生物技术学报, 1995, (02) :75-81

[6]

农药复配与复配农药[M]. 江苏科学技术出版社 , 韩丽娟等编著, 1994