优化差速离心法在血培养报警瓶MALDI-TOF MS细菌鉴定中的应用

目的评价用于血培养报警瓶基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorptionionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）细菌直接鉴定的前处理方法。方法建立优化差速离心法流程。收集首都医科大学附属北京同仁医院2015年10月至12月外周血培养报警标本100例（均为单一菌）,以转种培养后菌落MALDI-TOF MS鉴定为金标准,对比差速离心法优化前后、BRUKER SEPSITYPER试剂盒（简称试剂盒法）鉴定结果,评价优化差速离心法的准确率。收集2016年1月至10月外周血及体液培养报警标本516例（经革兰染色确认为细菌）,对优化差速离心法进行大样本应用研究。结果优化的差速离心法、试剂盒法及优化前的差速离心法鉴定准确率分别为97%、94%及92%,差异无统计学意义;优化的差速离心法鉴定分值>2.0的例数则多于其他两种方法,与优化前相比差异具有统计学意义（χ2=3.916,P=0.048）。516例样本单一菌486例,混合菌30例。优化的差速离心法鉴定准确率为92.2%（476/516）。外周血及其他体液样本鉴定准确率分别为96.5%（179/289）、86.8%（197/227）,差异有统计学意义（χ2=16.92,P<0.01）。单一菌鉴定准确率为97.1%（472/486）,其中革兰阳性球菌和阴性杆菌分别为96.9%、99.1%,均明显高于阳性杆菌（55.6%）,差异有统计学意义（χ2=25.329,P<0.01;χ2=48.526,P<0.01）。混合菌鉴定准确率为13.3%（4/30）。体液样本混合菌比例为11%（25/227）,显著高于外周血[1.7%（5/289）,χ2=20.008,P<0.01]。结论优化差速离心法鉴定率高、成本低、易操作,优于试剂盒法,对单一细菌MALDI-TOF MS血培养报警直接鉴定更具临床应用价值。