不同破壁方法提取结核分枝杆菌总RNA的比较

被引：4

作者：

罗影殊 ^{[1
]}

黄偌颖 ^{[1
]}

刘衡川 ^{[1
]}

高文凤 ^{[2
]}

机构：

[1] 四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室

[2] 四川省疾病预防控制中心结核病预防控制所

来源：

中国防痨杂志 | 2013年 / 35卷 / 03期

关键词：

分枝杆菌,结核; RNA,细菌; 逆转录聚合酶链反应; 细胞壁; 细菌学技术;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的建立简便有效的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)总RNA提取方法。方法采用5种方法,分别为160、240和400W超声波联合Trizol法(简称"160W超声法"、"240W超声法"和"400W超声法")、玻璃珠(简称"玻珠")联合Trizol法(简称"玻珠法")和Trizol法(简称"不加玻珠法"),对结核分枝杆菌标准株H37Rv进行破壁,提取总RNA。通过荧光定量逆转录PCR评价不同破壁方法对Mtb总RNA提取效果的影响,以灭菌超纯水代替模板为阴性对照。每种方法分别提取3份样本进行检测。最后结果为3份标本的平均值。结果玻珠法检测组Ct值为20.67,△Rn值为0.644;400W超声法检测组Ct值为22.09,△Rn值为0.571;240W超声法检测组Ct值为21.86,△Rn值为0.503;160W超声法检测组Ct值为25.21,△Rn值为0.411;不加玻珠法检测组Ct值为28.40,△Rn值为0.299;阴性对照Ct值为40.00,△Rn值为0.000。结论直观地从试验结果来看,玻珠法对结核分枝杆菌破壁效果好于超声法。

引用

页码：183 / 186

页数：4

共 11 条

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