羟基喜树碱诱导肝癌细胞凋亡前后线粒体疏水蛋白质组的定量分析

被引:5
作者
颜玉蓉
付玉荣
王伟佳
邱宗荫
机构
[1] 重庆医科大学检验系,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室
关键词
线粒体; 疏水蛋白质; c-ICAT; 羟基喜树碱; 亚细胞蛋白质组学;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2008.04.015
中图分类号
R735.7 [肝肿瘤];
学科分类号
100112 [医学生物化学与分子生物学];
摘要
抗癌剂羟基喜树碱可以通过线粒体途径诱导肝癌细胞凋亡.应用定量蛋白质组学技术分析羟基喜树碱诱导肝癌细胞凋亡前后的线粒体疏水蛋白质差异表达,探讨癌细胞凋亡机制及羟基喜树碱的抗癌机理.分离提取羟基喜树碱诱导肝癌细胞凋亡前后的线粒体,并采用顺序抽提法提取疏水蛋白质;用含稳定同位素亲和标签的c-ICAT试剂标记蛋白,利用基于多维色谱-线性离子阱/静电场轨道阱质谱联用技术的鸟枪(shotgun)法策略分析鉴定了在肝癌细胞凋亡前后的线粒体中表达量差异有显著统计学意义(P<0·05)的疏水蛋白144种,其中,12种蛋白的表达量在凋亡细胞中下调,而表达量在羟基喜树碱诱导细胞凋亡后上调10倍以上的蛋白43种.这些蛋白主要与细胞分裂增殖、分化凋亡、能量代谢、核酸代谢以及信号转导相关.该研究结果为在亚细胞定量蛋白质组水平上深入探讨羟基喜树碱的作用机理提供了新的实验依据,亦为研究肿瘤细胞凋亡机制提供了新的思路.
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