粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)的克隆表达、纯化及免疫学特性

被引：22

作者：

朱健琦 ^{[1
]}

刘志刚 ^{[1
]}

高波 ^{[1
]}

吉坤美 ^{[2
]}

邢苗 ^{[1
]}

机构：

[1] 深圳大学生命科学学院

[2] 深圳市微生物基因工程重点实验室

来源：

昆虫学报 | 2006年 / 02期

关键词：

粉尘螨; 变应原; 表达; 纯化; 特性鉴定;

D O I：

10.16380/j.kcxb.2006.02.008

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100108 [医学免疫学];

摘要：

粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)是粉尘螨Dermatophagoidesfarinae主要变应原,可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨,提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段,产物连接入T载体(pMD18)。经扩增后,用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片段连接到pET24a表达载体上,得到重组质粒pET24a-DerfⅠ,工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出DerfⅠ蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。表达产物经亲和层析纯化,用Westernblot及ELISA方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。

引用

页码：213 / 218

页数：6

共 8 条

[1]

蟑螂变应原Cr-PI包涵体的变复性研究 [J].