重组人乳铁蛋白基因克隆及表达

被引:7
作者
张述
王革非
王贞慧
张裕平
吴海祥
熊春发
余永恒
机构
[1] 丝宝集团科研中心生命科学研究所
[2] 丝宝集团科研中心生命科学研究所 武汉
[3] 武汉
关键词
人乳铁蛋白; 克隆; 表达; 毕赤酵母;
D O I
10.13200/j.cjb.2005.02.40.zhangsh.012
中图分类号
R346 [];
学科分类号
1001 ;
摘要
目的 构建重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株 ,并对表达产物进行评价。方法 由外周血白细胞总RNA经RT- PCR克隆获得HLF基因结构cDNA ,测序后克隆入酵母表达载体获得质粒pPIC9K- HLF ,线性化后电转化入毕赤酵母 ,经G4 -18 YPD筛选多拷贝后进行甲醇诱导表达。结果 获得基因与GenBank中的人HLF0 1基因基本相符。 2株多拷贝菌株诱导表达产物均能与人HLF抗体反应 ,具有抑制大肠杆菌生长的作用。结论 获得了能分泌有活性HLF的重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株。
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