水稻10kD醇溶蛋白基因克隆、序列分析及对植物百脉根的转化

应用ＰＣＲ 技术，从水稻基因组中扩增１０ ｋＤ 水稻醇溶蛋白基因的编码区，得到一特异的０．５ ｋｂ 的片段。对该片段进行酶切分析和全序列测定，结果表明： 该片段与Ｍａｓｕｍ ｕｒａ Ｔ．等的报道相比， 其核苷酸序列及推测的氨基酸序列的同源率分别为９５％ 和９３％ 。就其分子数计算，甲硫氨酸及半胱氨酸含量分别占１８．２％ 和９％ ， 含硫氨基酸总数为２７．２％ ， 比同类的１０ ｋＤ玉米醇溶蛋白的含硫氨基酸总数还要高。将该基因置于ｒｂｃ Ｓ启动子调控下，动员入农杆菌中，转化豆科植物百脉根（ＬｏｔｕｓｃｏｒｎｉｃｕｌａｔｕｓＬ．）， 在含有卡那霉素的抗性培养基上筛选抗性植株。利用ＰＣＲ 方法检测１０ ｋＤ 醇溶蛋白基因整合到百脉根基因组中