用实时荧光定量RT-PCR方法定量绵羊PrP基因的表达

被引：10

作者：

韩彩霞

赵德明

吴长德

宁章勇

杨建民

刘美丽

马李颖

机构：

[1] 国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学

来源：

中国农业大学学报 | 2006年 / 02期

关键词：

朊蛋白; RT-PCR; 基因表达; 实时荧光定量PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

S826 [羊];

学科分类号：

摘要：

为快速、准确定量绵羊PrP基因的mRNA,建立了绵羊PrP基因实时荧光定量聚合酶链反应检测方法。根据已报道的绵羊PrP基因序列,设计合成引物;采用RT-PCR方法扩增目的片段;构建标准重组质粒制备标准曲线,用于样品检测。结果发现,中枢神经系统组织PrP基因的表达量(copies/ng总RNA,39420)比外周组织(为7845)的高;在中枢神经系统中,脑干的PrP基因的表达量最高(为67020);外周器官中,淋巴结PrP基因的表达量最高(为29086),肾脏的表达量最低(为125)。建立绵羊PrP基因实时荧光定量PCR方法,对PCR扩增反应中每一个循环的产物进行定量分析,为进一步研究绵羊组织器官的PrP表达在传染性海绵状脑病发生中的作用提供基础数据。

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