麦冬皂苷B体外调控非小细胞肺癌A549细胞miRNA-34b表达的研究

目的:本研究主要观察不同方式处理后的非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞中mi RNA?34b表达水平,探讨mi RNA?34b对MET信号通路的调控机制,以及麦冬皂苷B(OPB)抑癌效应的分子机理,探寻治疗NSCLC的新靶点。方法:采用非小细胞肺癌A549细胞、胚肺成纤维细胞MRC?5、A549+OPB细胞、感染过表达慢病毒LV?hsa?mir?34b的A549细胞、以及感染阴性对照CON181B病毒的A549细胞作为研究对象,分别设为CON组、MRC?5组、CON+OPB组、Micro?up组、NC组。采用q RT?PCR方法检测mi R?34b在CON组、MRC?5组、A549+OPB组A549细胞中的表达情况。使用生物信息学软件预测mi RNA?34b可能的下游功能靶基因。使用q RT?PCR的方法定量分析OPB对MET基因表达的影响,用Western blot检测mi RNA?34b和OPB对靶MET蛋白表达的影响。结果:与MRC?5组相比,A549细胞中mi RNA?34b的表达明显减少,加入OPB后mi R?34b的表达增加。生物信息学预测显示MET基因是mi R?34b可能的关键下游靶基因。加入OPB后,MET基因水平和蛋白水平的表达均降低。结论:OPB可能通过上调A549细胞mi RNA?34b表达,抑制下游靶基因MET进而发挥抗癌作用。