牛布氏杆菌特异性抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

被引：5

作者：

赵伟栋 ^{[1
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韩文瑜 ^{[1
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冮森林 ^{[2
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雷连成 ^{[1
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王大力 ^{[2
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孙长江 ^{[1
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李铁峰 ^{[2
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杜涛峰 ^{[1
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张俊敏 ^{[1
]}

机构：

[1] 吉林大学畜牧兽医学院

[2] 吉林省地方病第一防治研究所

来源：

中国生物制品学杂志 | 2009年 / 22卷 / 12期

关键词：

牛布氏杆菌; 重组BP26蛋白; 间接ELISA;

D O I：

10.13200/j.cjb.2009.12.90.zhaowd.009

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

目的建立牛布氏杆菌特异性抗体间接ELISA检测方法,并进行初步应用。方法用大肠杆菌表达的牛布氏杆菌重组BP26蛋白作为检测抗原,用棋盘滴定法确定包被抗原和待检血清的最佳工作浓度,对各种反应条件进行优化,建立间接ELISA方法,并进行验证。采用建立的间接ELISA方法与传统的试管凝集试验同时检测116份血清样品,评价二者的符合率。结果间接ELISA的最佳反应条件为:抗原包被量5μg/孔;待检血清稀释倍数1∶200,作用时间60min;酶标二抗作用时间60min;封闭液为5%BSA,作用时间45min。S/P值≥0.363者判为阳性,S/P值≤0.291者判为阴性,介于两者之间判为可疑。该方法精密性良好,特异性较强,敏感性较高,与传统的试管凝集试验检测结果的符合率为93.3%。结论已成功建立了检测牛布氏杆菌特异性抗体的间接ELISA方法,为布氏杆菌病的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。

引用

页码：1244 / 1246+1250 +1250

页数：4

共 7 条

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