基于化学成分与肠道菌群探讨消癌解毒方中黄连-乌梅药对的配伍机制

被引:13
作者
史悦华 [1 ,2 ]
范汇森 [2 ,3 ]
刘晓 [3 ,4 ]
肖平 [3 ]
沈卫星 [2 ]
程海波 [2 ]
孙东东 [2 ]
机构
[1] 东南大学附属中大医院
[2] 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室
[3] 南京中医药大学药学院
[4] 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心
关键词
黄连-乌梅; 配伍; 肠道菌群; 16S rRNA基因测序; 含量测定;
D O I
10.14148/j.issn.1672-0482.2019.0199
中图分类号
R289.1 [方论];
学科分类号
100504 [方剂学];
摘要
目的探讨黄连-乌梅药对与消癌解毒方水煎液中部分生物碱类成分的含量差异,并比较药对与全方对小鼠肠道菌群的影响。方法采用Extend-C18(100mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温35℃,进样量2μL;离子化模式为电喷雾离子化(ESI),以正离子模式检测,开展方法学验证和含量测定研究。按照给药不同将小鼠分为正常组、全方高浓度组、全方低浓度组、药对高浓度组和药对低浓度组,连续灌胃给药7d,每组分别收集粪便样本,进行16S rRNA基因测序。结果建立的含量测定方法在一定浓度范围内线性关系良好,方法学验证结果均符合相关要求,木兰花碱与非洲防己碱在黄连、药对以及全方中的含量分别为:(4.433±0.133)(8.905±0.154)mg/g,(3.545±0.033)(9.170±0.051)mg/g,(5.287±0.038)(13.861±0.690)mg/g。全方组和药对组中拟杆菌门Bacteroides的丰度均高于正常组,而全方组和药对组中厚壁菌门Firmicutes的丰度均低于正常组。药对高浓度组中的疣微菌门Verrucomicrobia和变形菌门Proteobacteria的丰度高于其他组。结论液质联用方法和相关参数简便、可靠,可用于有关成分的含量检测。与单味药中含量相比,经过药对配伍后,非洲防己碱含量增加,而木兰花碱含量则略有降低;经过全方配伍后,2种成分的含量均增加。此外,肠道菌群实验表明无论是药对还是全方在给药后,会不同程度地影响肠道菌群内部占比改变,其可能对调节肠道系统平衡,具有一定帮助作用,从而为进一步阐释黄连-乌梅在消癌解毒方中配伍机制提供了参考和依据。
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