重组人胰高血糖素样肽-1的表达、纯化及其生物学活性

被引：19

作者：

张志珍

杨生生

毛积芳

机构：

[1] 第二军医大学生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学生物化学与分子生物学教研室,第二军医大学生物化学与分子生物学教研室上海,上海,上海

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2002年 / 01期

关键词：

重组人胰高血糖素样肽-1; 融合蛋白; 纯化; 生物学活性;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2002.01.002

中图分类号：

Q57 [激素]; Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

070307 [化学生物学]; 071007 [遗传学];

摘要：

为获得重组人胰高血糖素样肽 1[recombinanthumanglucagon likepeptide 1(7～ 37) ,rhGLP 1]并研究其生物学活性 ,采用亚磷酸二酯法合成hGLP 1cDNA的 6个寡核苷酸片段 ,拼接成完整的hGLP 1cDNA ,构建重组质粒pGEX hGLP 1,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)获得表达菌株 .高密度发酵培养的菌体超声破碎后 ,裂解液用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化得到GST融合蛋白 .经CNBr裂解、QAE SepharoseFF柱层析和脱盐 ,得到纯度大于 90 %的rhGLP 1,质谱测定分子量结果与理论值一致 .生物学活性分析表明 ,rhGLP 1具有明显的降血糖活性 .

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