一种苦荞主要过敏原基因cDNA的克隆及序列分析

被引:12
作者
侯晓军
畅文军
陈立钊
张政
刘知学
王转花
机构
[1] 山西大学生命科学与技术学院生物技术研究所,山西大学生命科学与技术学院生物技术研究所,燕山大学环境与化学工程系,山西大学生命科学与技术学院生物技术研究所,中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所,山西大学生命科学与技术学院生物技术研究所太原,太原,秦皇岛,太原,上海,太原
关键词
苦荞; 过敏蛋白; 3′-RACE; 克隆与序列分析;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2003.04.005
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
为了获得苦荞中主要过敏原的cDNA和由此推导的蛋白质序列 ,分析其结构特点 ,以苦荞幼根根尖为材料 ,提取总RNA并反转录mRNA为cDNA第一链 .通过RT PCR、3′RACE、基因克隆及序列测定 ,获得一种苦荞主要过敏蛋白基因的cDNA片段 (GenBank登录号为AY0 4 4918) .该cDNA片段由 76 8bp组成 ,包括 3′端非编码区 180个bp ,开放阅读框 5 88bp .可编码一个由 195个氨基酸残基组成的功能蛋白及一个终止密码 .苦荞主要过敏原基因与甜荞 2 2kD过敏蛋白、豆球类蛋白的核苷酸序列分别有 95 %和 93%的同源性 .其推导的氨基酸序列与甜荞球蛋白、刀豆蛋白、甜橙柠檬素分别有 93%、83%和 5 7%的同源性 .该过敏蛋白 183~ 188位氨基酸残基KEEEKE在多数不同过敏原中均存在 ,推测可能为其中的抗原决定簇序列
引用
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