HPLC法同步测定维生素预混合饲料中5种B族维生素

本实验建立同步测定维生素预混合饲料中烟酸、烟酰胺、维生素B6、维生素B2和维生素B1等5种B族维生素的高效液相色谱（HPLC）法。采用Hypersil C18色谱柱（250 mm×4.0 mm,5μm）,流动相为p H 3.0的磷酸盐缓冲液（0.01 mol/L KH2PO4-0.005 mol/L辛烷磺酸钠-0.5%三乙胺）-甲醇（V/V,75∶25）等度洗脱,柱温为35℃,流速为1.0 m L/min,紫外检测器在波长275 nm进行检测,外标法定量。结果表明,烟酸和烟酰胺的线性范围为75～1500μg/m L,维生素B6、维生素B2和维生素B1的线性范围为25～500μg/m L,线性相关系数为0.9996～0.9999,平均回收率为98.5%100.6%,相对标准偏差（RSD）为0.21%0.61%。此方法具有简单、快速和准确的特点,适用于维生素预混合饲料中5种B族维生素含量的同步测定。