粳稻幼胚转化系统的建立及除草剂抗性植株的获得

比较了上海市农业科学院作物育种栽培研究所培育出的花培15、秋丰、香粳834三个品种幼胚在光照和黑暗培养条件下愈伤组织的诱导频率，发现在同一培养条件下，不同品种幼胚愈伤组织诱导频率差异显著。在不同培养条件下，同一品种幼胚愈伤组织诱导频率差异不明显。但光照可显著提高幼胚的愈伤组织质量。将来自光照和黑暗条件下培养8～20d诱导的花培15幼胚愈伤组织置于添加不同激素的分化培养基上，发现光照条件下诱导的幼胚愈伤组织，更易分化，其分化频率显著高于黑暗条件下诱导的愈伤组织。添加6－BA2mg／L、NAA0.5mg／L、KT0.5mg／L的MS培养基最适合花培15幼胚愈伤组织的分化再生。经多次继代的花培15幼胚愈伤组织的分化能力显著低于初培养8～20d的愈伤组织。用基因枪法将含Act15’端调控的bar基因导入花培15、94－J－21、94－J－09、94－J－18、94－J－24等5个品种（系）预培养3d的幼胚。转化的幼胚在含PPT（Glufosinateammonium）4mg／L的MS培养基上诱导愈伤组织。抗性愈伤组织经2～3次继代后，转移至添加PPT4mg／L分化培养基M3上分化再生。在转化的5个品种中，仅获得花培15的抗性再生植株。