GFP基因在软枣猕猴桃愈伤组织原生质体中瞬间表达的初步研究

被引：16

作者：

朱道圩

米银法

陈延惠

王静毅

刘中杰

不详

机构：

[1] 河南农业大学林学园艺学院

[2] 河南农业大学林学园艺学院河南郑州

[3] 河南郑州

来源：

河南农业大学学报 | 2003年 / 02期

关键词：

软枣猕猴桃; 原生质体; 绿色荧光蛋白; 报告基因;

D O I：

10.16445/j.cnki.1000-2340.2003.02.010

中图分类号：

S663.4 [猕猴桃];

学科分类号：

090201 ;

摘要：

用PEG介导法对游离出来的软枣猕猴桃原生质体进行遗传转化,成功地将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入了原生质体,并获得了瞬间表达.结果表明,影响GFP基因转化的因素主要是材料的生理状态,PEG的种类和浓度;适宜的转化条件和方法为,将从白色、较为疏松愈伤组织中游离的原生质体,悬浮到质量分数为13%甘露醇的洗液(CPW13)中,置于45℃水浴中热激5min,再放在冰浴中迅速冷却;加入质粒,轻轻混匀后静止10min;逐滴加入质量分数40%PEG6000介导转化,终浓度为100g·L-1,在室温下放置20min;逐滴加入CPW13稀释转化后的原生质体,以避免PEG浓度剧烈变化造成细胞膜破裂.

引用

页码：142 / 145

页数：4

共 8 条

[1] 软枣猕猴桃原生质体培养与细胞团再生的初步研究 [J].

朱道圩 ;

秦永华 ;

郅玉宝 ;

易明林 ;

陈占宽 ;

胡湛 ;

不详 .

河南农业大学学报 , 2001, (03) :221-224

[2] GFP及其在植物学研究中的应用 [J].

刘继红 ;

邓秀新 .

生命的化学, 2001, (03) :225-226

[3] 低能氩离子束介导将绿色荧光蛋白基因导入小麦的研究 [J].

吴丽芳 ;

李红 ;

宋道军 ;

吴李君 ;

余增亮 .

南京农业大学学报, 2000, (03) :17-20+121

[4] 绿色荧光蛋白基因mgfp4在水稻愈伤组织中的瞬时表达 [J].

王泽宙 ;

邱全胜 .

北京师范大学学报(自然科学版), 2000, (03) :385-389

[5] 绿色荧光蛋白基因在青蒿转基因芽中的表达 [J].

陈大华 ;

叶和春 ;

李国凤 ;

刘本叶 .

植物学报, 1999, (05) :41-44

[6] 绿色荧光蛋白基因在水稻细胞中的高效表达 [J].

许新萍 ;

黄粤 ;

卫剑文 ;

李宝健 .

ActaBotanicaSinica, 1998, (01) :96-99

[7]

分子克隆实验指南[M]. 科学出版社 , (美)J.萨姆布鲁克(J.Sambrook)等著, 1992

[8]

Green fluorescent protein: an in vivo reporter of plant gene expression[J] . Randall P. Niedz,Michael R. Sussman,John S. Satterlee.Plant Cell Reports . 1995 (7)

← 1 →