不同标本对荧光实时定量PCR法测定HBV0-DNA结果的影响

被引:11
作者
陶志华
谢耀盛
周武
陈晓东
机构
[1] 温州医学院第一附属医院检验科
关键词
乙型肝炎病毒; 标本; 定量聚合酶链反应;
D O I
10.13602/j.cnki.jcls.2001.06.012
中图分类号
R446.9 [其他];
学科分类号
摘要
目的 利用沉淀煮沸裂解法提取HBV核酸 ,探讨不同的临床标本和贮存条件对荧光定量PCR法测定乙型肝炎病毒核酸(HBV NDA)结果的影响 ,为临床标本的收集和贮存提供依据。方法 按不同要求收集特定的临床标本 ,用本实验室使用的HBV DNA提取方法提取DNA模板 ,再用荧光实时定量PCR法检测HBV DNA的含量。结果 经EDTA、中等含量肝素、枸橼酸钠抗凝血浆标本与相应血清标本测定HBV DNA的含量无显著性差别均 (P >0 0 5 ) ,但高浓度肝素 (10 0 0U/ml)抗凝管结果显著降低 (F值为 2 5 96 ;P <0 0 5 ) ;溶血、高血脂标本、标本反复冻融、血浆 (清 )标本在室温下短期贮存 (48h内 )对HBV DNA含量均无明显影响 (P >0 0 5 )。结论 用本实验室使用的HBV DNA提取方法 ,可使抗凝剂及其它PCR反应抑制物质对HBV DNA测定结果影响降到最低 ,从而使临床无污染标本一般均可接受
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