加味独活寄生合剂对兔膝骨关节炎模型软骨TLR4/MyD88/NF-kB信号通路的影响

目的 观察加味独活寄生合剂对兔膝骨关节炎软骨组织中TLR4,MyD88,NF-κB表达的影响，探讨加味独活寄生合剂减缓关节软骨退变的可能作用机理。方法 将35只6月龄雄性新西兰兔按随机数字表法分为25只KOA造模组和10只正常组。用改良Videman造模法制备兔KOA模型。造模成功后，从正常组中随机选取6只实验兔作为空白组，从KOA造模组中随机选取18只KOA造模实验兔按随机分配的方式分为模型组、硫酸氨基葡萄糖组以及加味独活寄生合剂组，各组各6只。空白组、模型组予蒸馏水灌胃，硫酸氨基葡萄糖组予硫酸氨基葡萄糖混悬液灌胃，加味独活寄生合剂组予加味独活寄生合剂灌胃，疗程均为6周。给药结束，HE染色观察关节软骨并进行Mankin评分评估；WesternBlot法检测其TLR4、MyD88、NF-κB蛋白的表达；RT-PCR法检测其TLR4、MyD88、NF-κBmRNA的表达。结果 模型组与空白组比较，膝关节软骨破坏更为明显，Mankin评分升高，差异有统计学意义(P<0.01),软骨中MyD88、TLR4、NF-κBmRNA及蛋白表达水平均有所上调，差异有统计学意义(P<0.01)。加味独活寄生合剂组及硫酸氨基葡萄糖组与模型组比较，软骨损伤程度较轻，Mankin评分降低，差异有统计学意义(P<0.01),软骨中TLR4、MyD88、NF-κBmRNA及蛋白表达水平均有所下调，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 兔KOA关节软骨退变能被加味独活寄生合剂有效延缓，其作用机制可能与抑制软骨组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的活化，从而减轻炎症反应相关。