可溶性Ⅱ型胶原蛋白提取纯化条件的研究

目的优化实验条件,建立提取纯化可溶性Ⅱ型胶原蛋白(solublecollagentypeⅡ,SCⅡ)的可靠方法。方法选择鸡胸箭突软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖,对胃蛋白酶的消化方式、氯化钠盐析浓度、DEAE阴离子树脂种类进行研究。采用SDS-PAGE、吸收光谱分析、氨基酸成分分析对SCⅡ进行鉴定。结果4mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖,分二步加入胃蛋白酶的消化结果满意,氯化钠盐析浓度为2.4mol/L时最佳。SDS-PAGE电泳结果显示提取纯化的SCⅡ与Sigma公司的产品一致,SCⅡ最大吸收峰为230nm,在检出的15种氨基酸中甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量最高。结论改进后的方法具有材料广泛、实验条件简便、结果可靠等优点,适用于科研、临床各种规模SCⅡ的提取。所得产品纯度高、符合II型胶原的特征。