4Aβ15基因在毕赤氏酵母中的分泌表达及初步纯化

被引:2
作者
谭琳 [1 ]
谭昕 [2 ,3 ]
周鹏 [3 ]
姚志彬 [1 ]
机构
[1] 中山大学中山医学院
[2] 海南大学农学院
[3] 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词
4Aβ15基因; 毕赤氏酵母表达; 质谱分析; 饱和硫酸铵沉淀;
D O I
10.16605/j.cnki.1007-7847.2010.04.011
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
以pQE4Aβ15为模板,PCR扩增4Aβ15基因,并克隆到pMD18T载体中.以之进一步构建了酵母表达载体pPICZα4Aβ15.通过电转化,重组质粒pPICZα4Aβ15被整合到毕赤氏酵母GS115基因组中.甲醇诱导GS115/pPICZα4Aβ15表达,得到重组蛋白.SDS-PAGE显示重组蛋白的分子质量为18 kD,而4Aβ15的分子质量理论值为8 kD,经Western blot和质谱分析证实重组蛋白为4Aβ15.毕赤氏酵母GS115/pPICZα4Aβ15工程菌发酵上清经60%饱和硫酸铵沉淀初步纯化,获得纯度为80%的重组4Aβ15.
引用
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