丹参酮ⅡA对EA.Hy926氧化应激细胞模型自噬的影响及其时效关系的研究

被引:20
作者
曹慧敏
宋囡
张妮
王英
吴瑾
杨关林
贾连群
机构
[1] 辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室辽宁省中医转化医学研究中心
关键词
丹参酮ⅡA; 内皮细胞; 动脉粥样硬化; 氧化应激; 自噬;
D O I
10.13201/j.issn.1001-1439.2017.02.020
中图分类号
R285 [中药药理学];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的:研究丹参酮ⅡA对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(EA.Hy926)氧化应激模型自噬效应的影响及时效关系。方法:1采用MTT法分别观察不同浓度ox-LDL(模型组)及丹参酮ⅡA(丹参酮组)对EA.Hy926细胞增殖的影响,明确ox-LDL及丹参酮ⅡA作用于EA.Hy926细胞的浓度;2采用荧光免疫法细胞技术及免疫印迹技术检测细胞内LC3蛋白不同时间点6h、12h、24h表达的变化。结果:100mg/L ox-LDL作用于EA.Hy926细胞24h造成明显氧化应激损伤,丹参酮ⅡA能减轻此损伤。LC3/DAPI复染发现丹参酮ⅡA组LC3自噬小体在6h、12h、24h形成较模型组增多,在12h表达最多。免疫印迹技术发现LC3A/B蛋白表达水平在12h及24h时明显增高,但在12h时自噬效应蛋白LC3A/B表达最为明显。结论:丹参酮ⅡA上调EA.Hy926氧化应激细胞模型的自噬,保护细胞氧化应激损伤,并存在时效关系。
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