基于MALDI-TOF/TOF技术的单增李斯特菌四种血清型的快速鉴别

被引:9
作者
闫军 [1 ,2 ]
王娉 [2 ]
赵晓美 [2 ]
陈颖 [2 ]
孙冬梅 [1 ]
机构
[1] 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
[2] 中国检验检疫科学研究院农产品安全研究中心
基金
国家重点研发计划;
关键词
基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱; 单增李斯特菌; 血清型;
D O I
10.13304/j.nykjdb.2017.0749
中图分类号
S852.61 [病原细菌]; R446.5 [微生物学检验];
学科分类号
090601 ; 100208 ;
摘要
单增李斯特菌是一种重要的人畜共患病致病菌,其传统血清型鉴定方法具有耗时长、操作繁琐等缺点,现行的多重PCR方法无法精确判定其血清型。基于基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)的快速、准确、高通量等特点,应用该技术建立了单增李斯特菌4种血清型的鉴别方法,以实现食品样品中单增李斯特菌4种血清型的高通量快速甄别。采用优化的MALDI-TOF/TOF条件对4种血清型的单增李斯特菌标准菌株和分离菌株进行检测,发现单增李斯特菌4种血清型的质谱特征峰。选取最优的支持向量机算法,建立基于1/2a、1/2b、1/2c和4b血清型差异的判别模型,运用该模型鉴别4种血清型的单增李斯特菌。初步建立了单增李斯特菌4种血清型的MALDI-TOF/TOF快速鉴别方法。以4种血清型的单增李斯特菌标准菌株为阳性对照、144株食品分离株为检测对象,运用该方法对单增李斯特菌1/2a、1/2b、1/2c、4b四种血清型鉴定符合率分别达到92.7%、90.3%、100%、100%,多重PCR方法的符合率为71.4%、87.0%、96.2%、95.0%。可见,建立的MALDI-TOF/TOF方法可对4种血清型的单增李斯特菌快速鉴别。与多重PCR方法相比,该方法具有快速、高通量、重现性好等特点,可用于食品中单增李斯特菌血清型的快速鉴定。
引用
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