免疫亲和层析法纯化重组人促红细胞生成素的实验研究

被引：4

作者：

邓瑞春

张明伟

白云秀

汪劲松

毛宁

章金刚

周勇

机构：

[1] 军事医学科学院毒物药物研究所生化药理室

[2] 北京瑞得生物技术研究所

[3] 军事医学科学院野战输血研究所

[4] 北京中医药大学中西医结合研究所北京

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2002年 / 04期

关键词：

重组人红细胞生成素; 单克隆抗体; 免疫亲和层析; 酶联免疫吸附试验;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.002519

中图分类号：

R392.12 [免疫细胞生物学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的　以免疫亲和层析方法纯化重组人促红细胞生成素 (rhEPO)。方法　以rhEPO作为抗原 ,免疫Balb/C小鼠 ,制备抗rhEPO单克隆抗体 (mAb)。以纯化的抗rhEPOmAb 2F12与预活化的Sepharose 4B偶联 ,制成抗体亲和层析柱 ,纯化rhEPO。结果　经筛选共获得 4株可分泌抗rhEPOmAb的杂交瘤细胞株 ,分别为 :1A8、2F12、3D4和 3F10。亲和层析纯化的rhEPO经SDS PAGE显示单一条带 ;2g凝胶制备的层析柱一次层析可获得 1.5mg高纯度的rhEPO。利用纯化的mAb建立的ELISA法 ,用于检测rhEPO的蛋白含量可达ng水平。结论　免疫亲和层析法纯化rhEPO的效率高、纯度好 ,用纯化的mAb建立的ELISA法具有灵敏度高、重复性和稳定性好等优点

引用

页码：408 / 411

页数：4

共 6 条

[1] G蛋白亲和色谱法纯化动物血清、抗体效果比较 [J].

邓瑞春 ;

白云秀 ;

张明伟 ;

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曾怡 ;

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不详 .

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